免離心流程–可選磁珠吸附獲得上清,避免手工離心去沉淀步驟
高產(chǎn)量–可從≤1.5mL TB培養基中獲得高達20μg的質(zhì)粒DNA
通用型強–可適用于不同類(lèi)型的培養基,如LB/TB等
轉染級別–可獲得<0.1 EU/μg的無(wú)內毒素質(zhì)粒DNA
高純提取–產(chǎn)物無(wú)污染,A260/A280>1.8、A260/A230>2.0
磁珠法無(wú)內毒素質(zhì)粒小量提取試劑盒可用于提供內毒素水平為<0.1 EU/μg的高質(zhì)量質(zhì)粒DNA,下游產(chǎn)物可直接應用于真核轉染和其他對內毒素水平敏感的體外應用。
該試劑盒基于磁珠的技術(shù),可在≤1.5mL LB或TB或其他合適的生長(cháng)培養基中純化質(zhì)粒DNA。磁珠法無(wú)內毒素質(zhì)粒小量提取試劑盒可在大多數開(kāi)放式全自動(dòng)移液平臺和基于磁珠法的核酸提取儀上實(shí)現自動(dòng)化提取。純化的質(zhì)粒DNA內毒素含量可達<0.1 EU/μg,產(chǎn)量可因質(zhì)粒的拷貝數、使用的大腸桿菌菌株、培養基和生長(cháng)條件而異。
磁珠法無(wú)內毒素質(zhì)粒小量提取試劑盒采用改良的堿裂解法先制備出樣品裂解液,然后使用磁珠Mag-Bind®Particles LC(可按需求另購)或通過(guò)離心分離沉淀物。新型超順磁性磁珠Mag-Bind®Particles LC會(huì )與細胞碎片發(fā)生結合,利用磁性吸附將沉淀帶出,即可實(shí)現無(wú)離心方案,使其更適用于高通量、自動(dòng)化的工作流程。
應用:轉染、常規篩選、限制性?xún)惹忻赶?、轉化、PCR、DNA測序、體外轉錄和其他需要純凈DNA的應用
樣本:96孔深孔板每孔≤1.5mL過(guò)夜菌液
處理時(shí)間:95min完成1-96個(gè)樣本
結合能力:20ug
洗脫體積:50-100ul
1. 在各種質(zhì)粒類(lèi)型和培養基中均可高效提取

按照說(shuō)明書(shū)操作步驟,使用磁珠法無(wú)內毒素質(zhì)粒小量提取試劑盒以及競品公司試劑盒,從1.5mL DH5α培養基(n=3)中提取pGEM質(zhì)粒DNA。使用Thermo Scientific的NanoDropTM 2000c分光光度計對提取的質(zhì)粒DNA進(jìn)行測定。Omega Bio-tek試劑盒提取的質(zhì)粒內毒素(<0.1 EU/μg)水平更低,產(chǎn)量也高于競品公司。
2.與P公司相比,轉染效率更高

從1.5mL DH5α培養基(n=3)制備pGEM質(zhì)粒,并使用磁珠法無(wú)內毒素質(zhì)粒小量提取試劑盒以及競品公司的等效試劑盒進(jìn)行提取。使用2μL Lipofectamine轉染試劑,將200ng純化好的質(zhì)粒轉染到10,000個(gè)細胞中。使用Omega Bio-tek試劑盒純化的質(zhì)粒產(chǎn)生更高的生物發(fā)光信號,與競品公司相比轉染效率更高。
3.在Hamilton Microlab®Star™上實(shí)現自動(dòng)化質(zhì)粒提取,產(chǎn)量和純度一致

使用磁珠法無(wú)內毒素質(zhì)粒小量提取試劑盒試劑盒從1mL DH5α培養基中提取pGEM質(zhì)粒,使用Hamilton Microlab® STAR™平臺進(jìn)行全自動(dòng)提取,并使用Mag-Bind® Particles LC吸附去除沉淀,用100μL洗脫獲得質(zhì)粒DNA。使用Thermo Scientific的NanoDrop™ 2000c分光光度計進(jìn)行測定,質(zhì)粒的產(chǎn)量重復性高且A260/A280≥1.8,A260/A2300≥2.0。
4.在各種質(zhì)粒類(lèi)型和培養基中均可高效提取

磁珠法無(wú)內毒素質(zhì)粒小量提取試劑盒可處理各種樣品的初始條件,如不同質(zhì)粒類(lèi)型、分子量、培養基以及初始培養體積。質(zhì)粒產(chǎn)量可能因條件不同而存在差異。